全面普及步骤知识,让我们规范使用步骤,成就未来,赢得成功
每日更新手机访问:https://m.focusedphoto.net/
您的位置: 主页>步骤知识 >酶切质粒全步骤

酶切质粒全步骤

来源:www.focusedphoto.net 时间:2024-06-11 06:39:27 作者:深浅步骤网 浏览: [手机版]

酶切质粒全步骤(1)

什么是酶切质粒?

酶切质粒是种重要的实验室工具,用于将源DNA片段入到质粒中,以便进行基因工程研究focusedphoto.net。酶切质粒的制备需要进行多个步骤,包括质粒提取、酶切、凝胶电泳、回收等。

步骤:质粒提取

  首先需要从细菌中提取质粒。将细菌养至对数生长期,离心收集细菌,用缓冲液洗涤后,加入裂解液破坏细胞壁,使质粒释放到溶液中。随后进行离心分离,将上清液收集下来,加入等体积的异丙醇,使DNA沉淀PvyE。离心后将上清液倒掉,再用70%的乙醇洗涤DNA沉淀,最后用去离子水溶解DNA,得到质粒DNA。

步骤二:酶切

将质粒DNA与限制性内切酶起反应,酶切后的DNA片段可以入到质粒中。酶切反应需要在当的温度和pH值下进行,通常需要在37℃下反应2小时。酶切后的DNA片段需要进行凝胶电泳检测,以确酶切的效果和目标片段的大小来自www.focusedphoto.net

步骤三:凝胶电泳

将酶切后的DNA片段进行凝胶电泳分离,以确目标片段的大小。将DNA样品加入凝胶槽中,通电使DNA片段向电极移动,根据片段大小的同,DNA片段会在凝胶中同的带状图案。通与DNA分子量标品比较,可以确目标片段的大小。

步骤四:回收

将目标片段从凝胶中回收下来,以便入到质粒中www.focusedphoto.net。将凝胶切片,将目标片段切割出来,加入回收缓冲液中,用离心管离心,将上清液收集下来,加入异丙醇沉淀DNA片段,离心后倒掉上清液,用70%的乙醇洗涤,最后用去离子水溶解DNA片段。

酶切质粒全步骤(2)

步骤五:

  将回收的DNA片段入到质粒中,成酶切质粒。将回收的DNA片段与质粒加入反应体系中,加入DNA连接酶,使DNA片段与质粒连接,成酶切质粒。随后进行转化,将酶切质粒转化到细菌中,进行筛选和鉴,最终得到目标酶切质粒来源www.focusedphoto.net

总结

酶切质粒制备是基因工程研究中的重要步骤,需要进行多个步骤,包括质粒提取、酶切、凝胶电泳、回收和入。通这些步骤,可以将源DNA片段入到质粒中,实现基因工程的研究。

0% (0)
0% (0)
标签:步骤质粒
版权声明:《酶切质粒全步骤》一文由深浅步骤网(www.focusedphoto.net)网友投稿,不代表本站观点,版权归原作者本人所有,转载请注明出处,如有侵权、虚假信息、错误信息或任何问题,请尽快与我们联系,我们将第一时间处理!

我要评论

评论 ( 0 条评论)
网友评论仅供其表达个人看法,并不表明好好孕立场。
最新评论

还没有评论,快来做评论第一人吧!
相关文章
  • 二柄授权步骤

    什么是二柄授权?二柄授权是指在特定情况下,将授权人的权力委托给另一个人行使,以达到授权人所期望的目的。在商业、法律、政治等领域中,二柄授权都是非常常见的操作。二柄授权的步骤二柄授权的步骤主要包括以下几个方面:1.确定授权人和受权人

    [ 2024-06-11 06:16:40 ]
  • 立体口哨的画法步骤

    口哨是一种小巧玲珑的乐器,它能够发出清脆悦耳的声音,深受广大音乐爱好者的喜爱。而立体口哨则是一种更加精致、独特的口哨,它的外形不仅美观,而且能够产生更加丰富的音效。下面,就让我们一起来学习一下立体口哨的画法步骤吧!步骤一:准备工作首先,我们需要准备一些必要的材料,包括白纸、铅笔、橡皮、彩色笔、剪刀、胶水等。

    [ 2024-06-11 06:05:14 ]
  • 小孩编程学习步骤:从零基础到创造力

    编程已经成为了当今世界最重要的技能之一,而且越来越多的人开始在小学和初中阶段就开始学习编程。对于小孩子来说,编程不仅可以培养他们的逻辑思维,还可以提高他们的创造力和解决问题的能力。那么,小孩子如何学习编程呢?下面是一些小孩编程学习的步骤。第一步:了解编程语言

    [ 2024-06-11 05:55:18 ]
  • Ubuntu离线安装模块步骤

    Ubuntu是一种基于Debian的自由开源操作系统,广泛用于个人电脑、服务器和云计算等领域。在安装Ubuntu时,我们通常需要连接互联网下载软件包,但有时网络不稳定或者没有网络环境,就需要进行离线安装。本文将介绍Ubuntu离线安装模块的步骤。一、准备工作1. 下载Ubuntu镜像文件

    [ 2024-06-11 05:44:44 ]
  • 中国建设快贷怎么贷?详细步骤解析

    随着互联网的发展,越来越多的人开始选择线上**,其中建设银行的快贷产品备受关注。那么,中国建设快贷怎么贷呢?下面我们来详细解析一下。一、了解快贷产品中国建设银行快贷是一种线上快速**产品,可以通过手机银行、网上银行、建行掌上银行等渠道进行申请。该产品最高额度为50万元,最长期限为36个月,申请过程简单快捷,审核时间也比较快。二、申请条件

    [ 2024-06-11 05:31:59 ]
  • 叶雕画制作步骤:从选材到完成

    叶雕画是一种古老的中国传统工艺,以树叶为原料,通过手工雕刻、染色、组合等工艺制成各种图案和画作。这种工艺不仅具有很高的艺术价值,而且有很强的民间特色和文化内涵,是中华民族文化遗产中的重要组成部分。下面将介绍叶雕画的制作步骤。一、选材叶雕画的制作材料主要是树叶,不同的树叶有不同的特点和用途。一般来说,树叶要选取新鲜、柔软、平整、无病虫害的叶子。

    [ 2024-06-11 05:22:08 ]
  • 淀粉提取的操作步骤

    什么是淀粉?淀粉是一种碳水化合物,在植物中广泛存在,是植物的主要能量储备物质。淀粉是由葡萄糖分子组成的多糖,可以通过水解反应分解为葡萄糖,是人体必需的营养物质之一。淀粉提取的意义淀粉是一种广泛应用的生物材料,可以用于食品、医药、化妆品、纸张等领域。淀粉的提取是将植物中的淀粉分离出来,以便进一步利用。淀粉提取的操作步骤

    [ 2024-06-11 05:00:55 ]
  • 社会工作步骤及其重要性

    随着社会的发展,社会问题也越来越多,这些问题涉及到人们的生活、健康、教育、就业等方方面面。社会工作作为一种专业化的服务,旨在帮助人们解决这些问题,提高他们的生活质量。本文将介绍社会工作的步骤及其重要性。一、社会工作步骤1. 评估社会工作的第一步是评估,即对客户的需求进行评估。这一步非常重要,因为只有了解客户的需求,才能为其提供最合适的服务。

    [ 2024-06-11 04:41:05 ]
  • 画邻接矩阵步骤_如何提高英语口语水平

    英语作为全球通用的语言,对于我们的职业发展和日常交流都有着至关重要的作用。但是,很多人在学习英语时,往往会遇到口语难题,无法流利地表达自己的想法和意见。那么,如何提高英语口语水平呢?下面就为大家分享一些实用的方法。1.多听多说学习英语口语最重要的就是多听多说。可以通过听英语广播、看英语电影、听英语歌曲等方式来提高自己的听力和口语能力。

    [ 2024-06-11 04:30:44 ]
  • 修建立交桥步骤

    随着城市化进程的加速,道路交通的拥堵问题越来越严重。为了解决这一问题,修建立交桥成为了当下城市交通建设的重要措施之一。本文将介绍修建立交桥的步骤。一、规划设计在修建立交桥之前,需要进行规划设计工作。首先,需要确定立交桥的位置和规模,以及与周边道路的连接方式。其次,需要进行交通流量分析和预测,确定立交桥的设计参数,如桥梁跨度、桥墩高度、匝道长度等。

    [ 2024-06-11 04:19:57 ]